Etudes structurales de modèles membranaires par diffusion de neutrons et de rayons X
Institution:
Université Joseph Fourier (Grenoble)Disciplines:
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Cette thèse porte sur les modèles de membranes cellulaires utilisés dans l'étude des interactions peptides/lipides via la détermination des changements structuraux engendrés par la présence de peptides. Différents modèles constitués de bicouches de lipides, tous nouveaux pour ce genre d'étude, ont été étudiés. Leur choix est un compromis entre les contraintes liées aux techniques d'études structurales et les exigences de biomimétisme qui imposent de travailler en phase fluide, phase pertinente d'un point de vue biologique. Le peptide choisi est l'alaméthicine qui possède la propriété de créer des pores dans les membranes. Les échantillons ont été caractérisés par diffusion de rayons X et de neutrons. La microscopie optique et la microscopie à force atomique ont également été utilisées. Le premier modèle est composé de deux bicouches en solution, absorbées sur un substrat. Nous avons montré que, si la première bicouche est en forte interaction avec le substrat, la seconde bicouche est stable en phase fluide. Elle représente donc un meilleur modèle que la seule bicouche absorbée. Le second modèle de membranes est composé d'un petit nombre de bicouches déposées par "spin-coating" et hydratées par exposition à une vapeur saturée en eau. Nous avons montré que ces systèmes sont instables et tendent à démouiller. Nous avons explicité cette instabilité par la réduction des fluctuations due à la présence d'une interface lipides/air. Finalement, nous avons étudié les phases lamellaires en solution. Nous avons pu mettre en évidence, par l'analyse de la variation de la loi de gonflement, une insertion des peptides dans la membrane dépendant de la concentration. A faible concentration, l'insertion se fait au niveau des têtes lipidiques. A plus forte concentration, il y a formation de pores.