Abstract FR:

L'ATP synthase est un complexe enzymatique indispensable à la synthèse d'ATP, donc à la vie de toute cellule. Sa tige centrale paraissant très fortement impliquée dans les changements conformationnels, donc dans le mécanisme énergétique, nous nous sommes consacrés à son étude structurale. L'ATP synthase mitochondriale de la levure Saccharomyces cerevislae a constitué notre modèle d'étude et l'une de ses composantes, la sous-unité epsilon, a été au centre de notre travail. Nous avons déterminé les conditions expérimentales de synthèse et de purification à mettre en oeuvre pour l'obtenir pure. Son comportement structural dans différents systèmes de solvants à été analysé par dichroi͏̈sme circulaire, chromatographie par perméation de gel, spectrométrie de masse et électrophorèse. Sa forte tendance à s'agréger a été montrée. Les études RMN dans un solvant micellaire, nous ont permis d'identifier 33 systèmes de spins, de définir deux zones hélicoi͏̈dales de 19 et 9 résidus et de modéliser la structure 3D des 20 premiers résidus. Sa complexation avec sa partenaire naturelle dans la tige centrale, la sous-unité delta que nous avons obtenue par la méthode biologique de surexpression, a été réalisée. Un modèle moléculaire de la tige centrale de levure a été également construit, montrant les interactions entre les trois sous-unités gamma-delta-epsilon et le rôle de maintien de l'édifice moléculaire central joué par la sous-unité epsilon.