Mesure de produits de photo-oxydation des bases de l'ADN isolé et cellulaire
Institution:
Université Joseph Fourier (Grenoble)Disciplines:
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Abstract FR:
Les radiations ionisantes, la composante ultraviolette du rayonnement solaire, ou des agents chimiques, peuvent provoquer des dommages de l'adn, comme des cassures de chaine, des modifications des sucres et des bases nucleiques. Compte-tenu du role capital que joue ce biopolymere dans la cellule, l'identification et la mesure de ces dommages sont fondamentaux pour la comprehension des phenomenes de degradation causes par ces differents facteurs. Une partie de ce manuscrit est consacree a l'utilisation de methodes immunologiques pour la detection et le dosage de defauts de l'adn. L'obtention d'anticorps diriges contre l'adenine n#1-oxyde, lesion formee par action du peroxyde d'hydrogene sur l'adenine, nous a permis de mettre au point un dosage immunologique de ce dommage. Par ailleurs, cette methode de dosage a ete validee en utilisant la technique d'electrophorese capillaire. La derniere partie de ce travail concerne la methode des cometes qui permet la mise en evidence de dommages de l'adn directement dans la cellule. En associant cette technique a l'utilisation d'enzymes de reparation specifiques d'un defaut, il est possible de mesurer des lesions oxydatives des bases nucleiques telles que la 8-oxo-7,8-dihydro-2'-desoxyguanosine, a partir de seulement 20000 cellules.