Abstract FR:

L'etude de l'internalisation du fibroblast growth factor basique (fgfb) est realisee sur des fibroblastes (ccl39). Apres internalisation, le fgfb subit une proteolyse limitee qui conduit a la formation de deux peptides de masses moleculaires 9 et 6 kda. Des etudes cinetiques d'internalisation avec des concentrations croissantes de fgfb radiomarque montrent que pour des faibles concentrations de fgfb, un plateau d'equilibre est obtenu. De plus, l'internalisation est saturable. L'analyse par scatchard du fgfb internalise montre l'existence de deux familles de sites de haute et basse affinite dont les constantes apparentes de dissociation sont equivalentes a celles obtenues apres liaison a l'equilibre du ggfb dans les ccl39. Ces resultats suggerent que l'internalisation du fgfb met en jeu des recepteurs de haute et basse affinite. Cependant, pour des concentrations plus importantes de fgfb, le processus n'es plus saturable et implique uniquement des sites de basse affinite. La visualisation des sites d'interaction a la surface des ccl39 et apres internalisation du fgfb dans ces cellules est realisee grace a la mise au point d'une technique de pontage covalent avec un agent couplant photoactivable. Par cette technique, de nombreux sites d'interaction du fgfb de masses moleculaires variant de 80 a 320 kda sont observes a la surface et a l'interieur des ccl39. Ces sites d'interaction ne sont pas detectes par les techniques classiques de pontage covalent avec un agent bifonctionnel. Par ailleurs, des traitements cellulaires a l'heparitinase ii montrent que des proteo-heparanes sulfates sont necessaires a la fixation du fgfb et sont impliques dans l'internalisation du fgfb