Abstract FR:

La proteine bande 3, glycoproteine integrale la plus abondante de la membrane du globule rouge, est formee de deux domaines distincts, n- et c-terminaux, possedant chacun un role fonctionnel precis. Le domaine cytoplasmique de 43 kda interagit avec les proteines du squelette erythrocytaire et d'autres proteines cytosoliques. Le domaine transmembranaire de 55 kda catalyse l'echange electroneutre des anions chlorure et bicarbonate a travers la membrane erythrocytaire. Afin de caracteriser les sites de phosphorylation de la proteine, les membranes isolees ont ete phosphorylees par l'atp marque. La proteine bande 3 phosphorylee ainsi que ses segments cytoplasmique et transmembranaire ont ete purifies. L'analyse par rp-hplc des peptides trypsiques de ces trois polypeptides isoles nous a permis la localisation precise des residus phosphoryles. La tyr 8 est le site principal de phosphorylation de la proteine, la tyr 21 et la tyr 46 sont egalement phosphorylees mais a un degre moindre. Les cibles principales des caseine-kinases membranaires, sont les ser 28 et 50 et une ou plusieurs thr 39, 42, 44, 48, 49, 54, toutes dans le peptide t1. Deux autres tyrosines, la tyr 359 et la tyr 904, sont egalement des cibles des tyrosine-kinases. Ces residus se trouvent dans des regions de la proteine exposees vers le cytoplasme: la jonction entre le domaine cytoplasmique et transmembranaire et le peptide c-terminal respectivement. Nous avons egalement identifie le premier variant de la proteine: la proteine bande 3 memphis. Il s'agit d'une substitution du residu lysine 56 par un acide glutamique