Abstract FR:

La n-glycosylation des protéines, modification post-traductionnelle fréquente, s'effectue dans la lumière du réticulum endoplasmique par le transfert en bloc d'un oligosaccharide le glc#3man#9glcnac#2 à partir d'un oligosaccharide-lipide le glc#3man#9glcnac#2-p-p-dol, sur une séquence consensus de la protéine. Dans une lignée dérivant d'hepatocarcinome humain (les cellules hepg2), la n-glycosylation est accompagnée de la libération de quinze à vingt pour cent d'oligosaccharides dont l'origine glc#3man#9glcnac#2-p-p-dol est montrée pour une majeure partie d'entre eux. Les oligosaccharides libérés dans la lumière du réticulum endoplasmique sont directement transportes dans le cytosol ou une endoglucosaminidase et une mannosidase cytosoliques les élaguent jusqu'à la formation d'un produit limite, le man#5glcnac#1 linéaire. Nous avons étudié le devenir des oligosaccharides libres cytosoliques sur la lignée hepg2. Des expériences de pulse-chasse contrôles montrent la disparition des oligosaccharides libres après trois à quatre heures de chasse. Au contraire, la présence de la concanamycine à, qui inhibe les atpases vacuolaires stabilise les oligosaccharides libres dans les cellules. Ceux-ci retrouves dans les compartiments vésiculaires ont des structures compatibles avec une origine cytosolique, ce qui montre un transfert des oligosaccharides libres du cytosol vers un compartiment acide. Alors que le transfert n'est pas modifié par des inhibiteurs de la macro autophagie, il est affecté après l'inhibition de la mannosidase cytosolique et la réduction du niveau d'atp cellulaire, et indique que la dégradation partielle et une source d'énergie sont nécessaires pour assurer le transport. Nous avons montré par des expériences de fractionnement subcellulaire que les oligosaccharides libres cytosoliques et particulièrement le man#5glcnac#1 linéaire sont transportés vers les lysosomes. En conclusion, ces travaux et ceux réalisés précédemment au laboratoire présentent un nouveau trajet intracellulaire, du réticulum endoplasmique vers le cytosol et du cytosol vers les lysosomes.