La phosphorylation, par la caséine kinase II, des centrines humaines, régule l'association avec leurs cibles cellulaires
Institution:
Paris 6Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
Centrins are calcium-binding proteins characterized by fours “EF-hand” motifs and by a good conservation among the eukaryotes. The interaction of centrins with several cellular targets has for consequence the association of this protein to various cellular functions, such as involvement in visual phototransduction cascade, DNA repair, centrosome duplication and the export of ARNm from the nucleus to the cytoplasm. The cellular binding partners of centrins are characterized by one or several repetitive the sequence of which is composed of hydrophobic residues in the 1, 4 and 8 position, responsible for the binding to centrins. The function of centrins is regulated by the conformational changes induced by calcium, as well as, by phosphorylation. The thesis work focused on the in vitro casein kinase II protein-phosphorylation process concerning the centrins, and on the study of the effect of the phosphorylation on the binding properties of centrins with their cellular targets, keeping a deep attention to the mechanisms of association to form the complexes. Furthermore, a new cellular target was analyzed during this project: β-Transducin, a protein involved in the visual phototransduction cascade, which is characterized by one centrin-binding motif situated to its C-terminal extremity.
Abstract FR:
Les centrines sont des calciprotéines caractérisées par quatre motifs « EF-hand » et leur grande conservation chez les eucaryotes. L’interaction des centrines avec plusieurs cibles cellulaires à pour conséquence leur participation, à plusieurs mécanismes cellulaires, comme la cascade de photo transduction dans la rétine, la réparation de l’ADN, la duplication du centrosome et le transport de l’ARNm du noyau vers le cytoplasme. Les partenaires cellulaires des centrines possèdent un ou plusieurs motifs ayant des résidus hydrophobes conservés dans la position 1, 4 et 8, qui lient la calciprotéine. La régulation des fonctions des centrines est réalisée par le calcium, mais également, par la phosphorylation. Le travail de thèse a porté sur la caractérisation du processus de phosphorylation, in vitro, des centrines humaines, par la caséine kinase II, et sur l’étude de l’effet de la phosphorylation sur l’interaction des centrines avec leurs cibles, tout en gardant une attention spécifique au mécanisme d’association des complexes. De plus, une nouvelle cible cellulaire a été analysée dans le cadre de ce projet : la Transducine β, protéine impliquée dans la cascade de photo transduction et caractérisée par un motif de liaison à la centrine situé à son extrémité C-terminale.