Abstract FR:

Dans la prostate humaine trois gènes de kallicréines tissulaires codent les protéases HK1, HK2 et HK3, libérées dans le fluide séminal. HK2, récemment purifiée, est étudiée comme marqueur sérique des pathologies prostatiques en remplacement ou en complément du marqueur actuel HK3 (PSA, Prostate specific antigen). HK1 est connue pour son activité productrice de kinine. Dans le tractus génital et les foyers métastatiques. Le rôle de ces protéases est méconnu. L'activité enzymatique de HK1 peut être suivie avec des substrats synthétiques contrairement à celles de HK2 et HK3. Des inhibiteurs de la famille des serpines régulent leur activité ; le PCI (protein C inhibitor) inhibe les trois enzymes. L'#1-Antichymotrypsine (ACT) inhibe HK3 et la Kallistatine HK1. Ces serpines interagissent comme des substrats suicides avec leur protéase cible et sont clivées au niveau de leur boucle réactive. Les séquences entourant ces sites de clivage ont été utilisées pour élaborer des substrats peptidiques fluorogéniques. La même stratégie a été utilisée pour développer des substrats à partir des semenogelines, protéines structurales du coagulum seminal et substrats naturels de HK3. Les peptides dérivés du PCI sont clivés préférentiellement par HK1 et HK2, et après modification permettent d'obtenir des substrats spécifiques pour chacune. Aucun substrat sensible de HK3 n'a pu être développé à partir des serpines ; le clivage d'un peptide dérivé de l'act, inhibiteur physiologique de HK3, obtenu dans des conditions expérimentales optimisées, suggère un mode d'interaction particulier entre ces deux partenaires. Un substrat 100 fois plus sensible que les substrats actuels a été synthétisé pour HK3 à partir d'une séquence entourant un site de clivage post-éjaculatoire de la semenogeline. Les séquences peptidiques de cibles naturelles des Kallicréines ont permis de synthétiser des substrats sensibles et spécifiques ; leur utilisation permettra de mieux comprendre le rôle biologique des enzymes.