Abstract FR:

Le but de cette étude était de définir les caractéristiques physico-chimiques, critiques pour l’intégrité structurale et fonctionnelle des petites protéines de choc thermique (ou small heat shock proteins ou sHsps), natives ou pathogènes. Les sHsps sont exprimées chez la plupart des êtres vivants, chez l’homme il en existe 11, où elles interviennent dans la gestion des stress. Ces protéines ont en commun un domaine « -cristalline » très conservé, la formation de larges oligomères, une structure dynamique liée à l’échange de sous-unités et une activité de type chaperon moléculaire. Certaines mutations ponctuelles des sHsps sont liées à des cataractes, des myopathies et des neuropathies. Les sHsps peuvent jouer un rôle dans l’apoptose et certains cancers et être associées aux plaques séniles. Je me suis intéressée aux -cristallines humaines et bovines et à la Hsp26 de levure. Le développement de méthodes biochimiques et l’optimisation de protocoles d’expression et de purification constituent la première étape de ce travail. La diffusion dynamique et statique de la lumière (DLS, MALS) et la diffusion des rayons X aux petits angles (SAXS) ont été les principaux outils utilisés pour l’étude de la structure quaternaire et des transitions conformationnelles des sHsps. J’ai élaboré des tests et comparé l’activité protectrice des sHsps vis-à-vis de cibles modèles et physiologiques. J’ai analysé différents mutants, comme le mutant pathologique R120G de l’B-cristalline. Enfin, j’ai analysé la capacité des sHsps à échanger des sous-unités par des techniques de chromatographie. Ces résultats contribuent à mieux définir la relation dynamique-structure-fonction-dysfonction des sHsps.