Abstract FR:

L'objectif principal de ce travail est l'étude des différentes étapes de la fabrication de souches d'hybridomes et de la culture en masse des anticorps monoclonaux produits. Après une description détaillée des techniques utilisées, sont présentés les résultats des fusions réalisées après immunisation (par plusieurs antigènes) des lymphocytes de souris soit in vivo soit in vitro. Ensuite sont expliqués la sélection et les différents modes de culture et de sauvegarde de ces souches d'hybridomes obtenues: anti beta lactoglobuline, anti alpha 1 antitrypsine et anti hormone lactogène placentaire. Les productions d'anticorps monoclonaux in vivo (ascite de souris) et in vitro (bioréacteur) sont développées. Une étude comparative de la croissance et du métabolisme des cellules cultivées dans des milieux complémentés soit par 10% de sérum de veau ftal, soit par 9% de lactosérum (sous produit de la fabrication fromagère peu onéreux) et 1% de sérum de cheval a été menée et nous avons mis au point un système original de culture des cellules d'hybridomes en bioréacteur: les cellules étant fixées dans une mousse de polyéther, elles sont alimentées en continu par un milieu régulé grâce à un cytoculteur et complété par un mélange de lactosérum et de sérum de cheval a 9% et 1%. Des corrélations établies entre certains marqueurs biochimiques et le nombre de cellules vivantes et mortes permettent le suivi du système. Enfin, dans l'optique de production en masse d'anticorps, une série d'expériences a détermine un certain nombre de conditions permettant d'obtenir de plus grandes quantités d'anticorps monoclonaux à un cout réduit.