Le transporteur mitochondrial d'ADP/ATP (ANC2) de saccharomyces cerevisiae. Elaboration et caractérisation de formes colorées par voie chimique ou par fusion génique, en vue d'approches cristallographiques
Institution:
Université Joseph Fourier (Grenoble)Disciplines:
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Abstract FR:
Le transporteur mitochondrial d'adénine nucleotides est une protéine membranaire qui catalyse l'échange d'ADP cytoplasmique contre l'ATP néo-synthétisé dans la matrice. Le travail présenté dans ce mémoire porte sur la coloration du transporteur Anc2p de Saccharomyces cerevisiae pour faciliter sa cristallisation dans une phase cubique de lipide. Le premier volet présente une approche de coloration chimique basée sur l'emploi de réactifs des thiols. Le second volet expose une stratégie de coloration par fusion génique du transporteur avec le cytochrome c de S. Cerevisiae. Les protéines de fusion obtenues Anc2-Cycl (His6)p et Cycl-Anc (His6)p, sont focntionnelles et leurs caractéristiques ont été étudiées de manière détaillée. La protéine Anc2-Cycl (His6)p a été purifiée à homogénéité pour entreprndre les essais de cristallisation.