Identification de nouveaux antigènes lipidiques mycobactériens et caractérisation des bases moléculaires de leur présentation par les protéines CD1
Institution:
Toulouse 3Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
The proteins CD1a to CD1d ensure the presentation of lipidic antigens such as compounds of Mycobacterium tuberculosis'envelope, to T lymphocytes. The characterization of the specificity of a CD1b-restricted T cell clone allowed to describe a new mycobacterial antigen: the Glycerol Monomycolate (GroMM). The clone also recognizes the Glucose Monomycolate (GlcMM). This cross-reactivity could be understood through the molecular modelling of CD1b/antigen complexes showing that these two antigens can adopt a stackable position. Besides, we observed that by a still unknown mechanism, the antigenicity of GroMM is strongly enhanced by the addition of individually inactive lipids. Understanding this antigenic potentiation should have applications for vaccine formulation. The processing mechanisms of mycobacterial lipidic antigens were studied on the model of phosphatidyl-myo-inositol mannosides (PIM). Their osidic part is processed by an ?-mannosidase which requires the assistance of CD1e isoform whose mode of action remains misunderstood. We showed that CD1e owns "Lipid Transfer Protein" properties through which it could extract PIM from membranes to facilitate the action of the enzyme. To highlight other enzymes involved in the processing of these antigens, description of their active minimum structure was undertaken by analyzing the antigenicity of PIM fragments obtained by in vitro digestion. The activity of products generated by lipases suggests that there is also a processing of the lipid part of PIM.
Abstract FR:
Les protéines CD1a à CD1d assurent la présentation d'antigènes lipidiques, tels que les composés de l'enveloppe de M. Tuberculosis, aux lymphocytes T (LT). En caractérisant la spécificité d'un clone de LT CD1b-restreint, un nouvel antigène mycobactérien a été mis en évidence: le Glycérol Monomycolate (GroMM). Le clone reconnait également le Glucose Monomycolate (GlcMM). Cette réactivité croisée a pu être comprise grâce à la modélisation moléculaire des complexes CD1b/antigène en montrant que ces deux antigènes peuvent adopter un positionnement superposable. De plus, nous avons observé que, par un mécanisme encore inconnu, l'antigénicité du GroMM est fortement accrue par l'addition de lipides qui, individuellement, sont inactifs. La compréhension de cette potentialisation antigénique devrait avoir des applications en termes de formulation vaccinale. Les mécanismes d'apprêtement des antigènes lipidiques mycobactériens ont été étudiés sur le modèle des phosphatidyl-myo-inositol mannosides (PIM). Leur partie osidique est apprêtée par une ?-mannosidase qui requiert l'assistance de l'isoforme CD1e dont le mode d'action restait incompris. Nous avons montré que CD1e possède des propriétés de " protéine de transfert de lipides " grâce auxquelles elle pourrait extraire les PIM des membranes pour faciliter l'action de l'enzyme. Afin de mettre en évidence d'autres enzymes impliquées dans l'apprêtement de ces antigènes, la description de leur structure minimale active a été entreprise en analysant l'antigénicité de fragments de PIM obtenus par digestion in vitro. L'activité de produits générés par des lipases suggère qu'il existe aussi un apprêtement de la partie lipidique des PIM.