Nucléotide cyclique phosphodiestérase du cytosol cardiaque : caractérisation biochimique, pharmacologique et purification de la forme AMPc spécifique
Institution:
Lyon, INSADisciplines:
Directors:
Abstract EN:
The cyclic nucleotide phosphodiesterase. Responsible for 3’, 5’ cyclic monophosphate nucleotide hydrolysis. Is an enzyme system including multiple isoenzymatic forms with distinct tissular localization. Different regulation and also different sensibility towards inhibitors. We have pointed out the importance of sulfhydryl groups at the catalytic and regulating sites of the different isoenzymatic forms in cardiac soluble fraction. We showed that cyclic AMP-specific form is quite equivalent in heart and arterial cytosolic fraction both from a biochemical (chromatographie behaviour. PHi. Kinetic properties) and a pharmacological point of view (sensibility to different chemical families of drugs) (collaboration with the laboratory of professor Stoclet). The inhibitory potency of compounds related to Rolipram was investigated (collaboration with the laboratory of professor Wermuth). This work allowed us to draw structure-inhibitory activity relationships and to point out several potent and/or specific inhibitors toward the cyclic AMP specific isoenzyme. Which is of particular interest both in cardiovascular pharmacology and in biochemistry (affinity chromatography ligand). The heart cyclic AMP-specific form was purified near homogeneity by affinity chromatography on immobilized specific inhibitor and then by isoelectric focusing and gel filtration. Its main biochemical properties were determined.
Abstract FR:
La nucléotide cyclique phosphodiestérase (PDE), responsable de la dégradation des nucléotides 3', 5’-cycliques monophosphates , est un système multi enzymatique comprenant différentes formes différemment sensibles aux inhibiteurs et différemment distribuées dans les tissus. Nous avons montré l 'importance des groupements thiols au niveau des sites catalytiques et régulateurs des différentes formes isoenzymatiques de la fraction cytosolique cardiaque. Nous avons montré que la for me AMP cyclique spécifique du cytosol cardiaque présente une grande similitude avec la forme équivalente du tissu artériel tant sur le plan biochimique ( comportement chromatographique , PHi, propriétés cinétiques ) que sur le plan pharmacobiochimique ( sensibilité à différentes familles chimiques de drogues ) (travail mené avec le laboratoire du professeur Stoclet ). La recherche du pouvoir inhibiteur d'une série de composés apparentés au Rolipram ( travail mené en collaboration avec Je laboratoire du professeur Wermuth, Strasbourg) nous à permis de dégager des relations structure-activité inhibitrice et de mettre en évidence plusieurs composés inhibiteurs puissants et/ou sélectifs d'une forme particulière de PDE potentiellement intéressants sur le plan thérapeutique dans le domaine cardiovasculaire et sur le plan biochimique comme ligand pour la chromatographique d'affinité. La forme AMPcyclique spécifique du tissu cardiaque, purifiée par chromatographie d'affinité sur inhibiteur spécifique immobilisé puis focalisation isoélectrique et gel filtration, est proche de l'homogénéité. Ses principales caractéristiques biochimiques ont été déterminées.