Abstract FR:

Depuis les annees 20, mycobacterium bovis bcg (bacille calmette-guerin) est le vaccin vivant utilise pour la protection antituberculeuse. Pourtant, l'existence d'une variabilite, de 0 a 80%, de la protection antituberculeuse induite par ce vaccin demontre clairement une derive des souches de bcg actuellement utilisees. Un composant majeur des parois mycobacteriennes, le lipoarabinomannane ou lam est suppose, aujourd'hui, etre un facteur determinant dans l'infection et la survie intramacrophagique des mycobacteries, etapes necessaire a la mise en place d'une immunite protectrice par le bcg. L'objectif de ce travail a donc consiste en une analyse comparative de quatre souches de bcg (pasteur, copenhague, glaxo et tokyo), chacune dotee d'un pouvoir vaccinant variable. Cette etude est centree sur l'analyse structurale des lams produits par ces souches vaccinales. Dans un premier temps, nous avons tente d'ameliorer la strategie de purification du lam, travail qui nous a conduits a la caracterisation de deux sous-populations de lams par souche. Tous ces composes se sont averes appartenir a la famille des lams mannosyles ou manlams. Dans un second temps, une etude rmn bidimensionnelle homo- (cosy, hohaha) et heteronucleaire (hmqc, hmbc) nous a permis, pour la premiere fois, de localiser, avec precision, des residus de succinates sur la molecule. Une approche semi-quantitative par l'analyse des spectres 1d (#1h) a egalement ete menees sur ces manlams. Enfin, afin d'evaluer le degre de mannosylation des differents manlams. , nous nous sommes interesses a la mise au point d'une strategie utilisant la chromatographie echangeuse d'anions a haut ph (hpaec) et la fab -ms. Les resultats peu probants obtenus nous ont conduit a nous orienter vers l'electrophorese capillaire qui, dans un premier temps, nous a permis d'acceder a l'aspect qualitatif de la mannosylation des lams. Nous nous sommes ensuite focalises sur l'elaboration d'une strategie en vue d'aborder, a l'aide de cette technique, l'aspect quantitatif de cette analyse.