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Imagerie intravitale par microscopie biphotonique : application à l'étude des effets de la radiothérapie synchrotron par microfaisceaux sur la microvascularisation corticale de la souris

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Jan. 1, 2006

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Parmi les techniques optiques d'étude du vivant, la microscopie de fluorescence par excitation à deux photons permet une imagerie de fluorescence tridimensionnelle en profondeur dans les tissus biologiques avec une haute résolution temporelle (de l'ordre de la ms) et une haute résolution spatiale (micrométrique). En collaboration avec une équipe de biologistes de l'INSERM, nous avons utilisé cette technique pour étudier in vivo les effets sur la microvascularisation corticale de la souris d'un nouveau protocole de radiothérapie réalisé au Synchrotron de Grenoble et destiné au traitement des tumeurs cérébrales: la radiothérapie par microfaisceaux. Nous avons imagé la microvascularisation corticale de la souris jusqu'à 500 !-lm de profondeur dans le cortex, à différents temps après irradiation et pour deux doses (312 et 1000 Gy), en injectant simultanément en intraveineuse deux colorants fluorescents (300 et 70000 Da) pour détecter une éventuelle perméabilisation dépendant de la taille des molécules. Aucune modification morphologique ni perméabilisation importante des capillaires n'ont été décelées, notamment au niveau du passage des microfaisceaux, témoignant d'un faible impact de l'irradiation sur la microvascularisation saine. Nous avons parallèlement développé une méthode de mesure in vivo du volume sanguin cérébral qui ne nécessite pas d'analyse morpho métrique et est donc rapide ainsi qu'une technique d'étude de la perméabilité vasculaire.