Abstract FR:

Un réseau de micropiliers original dédié à la réalisation de séparations électrophorétiques de protéines a été développé. Il consiste en une zone rectangulaire de micropiliers en PDMS (Polydiméthylsiloxane) en protubérance au-dessus de la masse de PDMS. Ce réseau permet de délimiter et de maintenir un volume donné de liquide par capillarité et a été choisi pour mimer une structure de gel. La plateforme de micropiliers a été conservée à ciel ouvert afin de pouvoir réaliser des empreintes après séparation des protéines en vue de leur détection et d’applications futures dans le domaine de l’immunodiagnostic. La géométrie du réseau de micropiliers a été optimisée en évaluant l’influence de la forme des piliers, de leur taille et de la distance inter-piliers sur l’évaporation et les séparations électrophorétiques. Les conditions d’analyse, c’est-à-dire la composition de l’électrolyte, la température et le mode de dépôt des échantillons, ont été étudiées et optimisées. Des mélanges de protéines modèles ont été séparés avec succès sur ce nouveau dispositif par focalisation isoélectrique ou électrophorèse de zone, sans perdre le pouvoir résolutif obtenu sur les mini-gels conventionnels. La plateforme de micropiliers à ciel ouvert conduit à des temps d’analyse plus courts et peut être réutilisée à maintes reprises tandis que les gels sont à usage unique. Des séparations par électrophorèse bidimensionnelle peuvent être développées sur ces dispositifs et leur application en protéomique est envisagée. Nous avons appliqué ce nouveau support prometteur pour des séparations électrophorétiques d’allergènes alimentaires dans une perspective de diagnostic