Electrophorèse capillaire et détection colinéaire de fluorescence induite par laser
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Toulouse 3Disciplines:
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L'electrophorese capillaire est une methode qui permet de separer efficacement des composes organiques ou mineraux a l'interieur d'un capillaire rempli d'un electrolyte, et de diametre interieur compris entre dix et cent micrometres. Elle souffre cependant de la faible sensibilite des detecteurs qui lui sont dedies, en raison notamment de l'etroitesse du capillaire et donc des faibles volumes d'echantillon injectes. Son application a l'analyse des traces de molecules organiques contenues dans les fluides biologiques, necessite l'utilisation d'un mode de separation et d'un systeme de detection qui conferent une bonne selectivite et une grande sensibilite. Dans la premiere partie de notre travail, et a partir des proprietes physico-chimiques des derives thyocarbamyle-fluoresceines d'acides amines et d'amines biogenes, nous avons developpe et verifie les modeles qui permettent d'optimiser la separation de ces solutes par un mode particulier de l'electrophorese capillaire, la chromatographie capillaire micellaire electrocinetique. Dans la deuxieme partie, nous avons developpe sur la base d'un microscope a epi-fluorescence, un detecteur de fluorescence induite par laser colineaire a lentille spherique qui autorise la detection de derives d'acides amines et d'amines biogenes et ce jusqu'a des concentrations de l'ordre de dix moins douze moles par litre. Dans la derniere partie, nous avons combine la chromatographie capillaire micellaire electrocinetique avec ce detecteur pour doser les acides amines et les amines biogenes que contiennent diverses matrices biologiques, dont le liquide cephalo-rachidien et le vin. Cette methode est egalement appliquee a la realisation d'une etude cinetique rapide de la racemisation de la l-serine. Ce travail a permis l'industrialisation et la mise sur le marche de ce detecteur