Development of an integrated system for PCR amplification in sub-microliter droplets
Institution:
Paris 6Disciplines:
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Abstract EN:
Cette thèse décrit le développement d'une plateforme d'amplification d'ADN dans des microgouttes transportées par une huile fluorée. Dans la première partie du projet nous avons mis au point des protocoles pour la production des puces microfluidiques en utilisant un nouveau matériau (Dyneon THV). Ce polymère fluoré est très hydrophobe, transparent et présente une température de fusion faible. Ces puces sont adaptées au transport de gouttes d'eau dans les huiles fluorées, ainsi qu'à la manipulation des solvants organiques et à la détection par fluorescence. Nous avons ensuite couplé ces puces avec un système pour la production des gouttes à partir des réactifs stockés dans une plaque microtitre. Cette approche permet d'utiliser un système de chauffage planaire, plus adapté pour la détection en temps réel. Ce système nous a permis de valider l'amplification par PCR dans des gouttes de 60 nanolitres, et représente une première étape vers la réalisation d'une plateforme automatisée
Abstract FR:
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