La chromatographie de partage centrifuge en mode hydrostatique. Theorie et applications
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Paris 6Disciplines:
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La ccc (chromatographie a contre-courant) ou cpc (chromatographie de partage centrifuge) est une methode de separation qui utilise deux phases liquides non miscibles entre elles. L'une, retenue dans la colonne sous l'effet d'un champ de force centrifuge, est comme en cpl (chromatographie en phase liquide) la phase stationnaire, l'autre la phase mobile. Deux rotations differentes des colonnes, planetaire et non planetaire, definissent respectivement les modes hydrodynamique et hydrostatique. Ce travail, dans une premiere partie, a consiste a etudier la cpc en mode hydrostatique, en particulier la retention de phase stationnaire suivant divers parametres: vitesse de rotation, debit de la phase mobile, mode de retention de la phase stationnaire, temperature, composition du systeme de solvants, puis de la comparer a la cpc hydrodynamique du point de vue de l'efficacite des separations. La deuxieme partie est consacree a l'optimisation d'une separation en etudiant l'influence de la selection des systemes de solvants, du mode d'elution de la phase mobile et de l'efficacite sur la resolution. Ainsi, a partir d'une separation analytique de deux antibiotiques appartenant a la famille des pristinamycines, l'influence du volume d'injection et de la concentration injectee sur differents parametres chromatographiques (retention de phase stationnaire, efficacite, resolution) a permis une transposition aisee en chromatographie preparative et l'obtention d'une separation complete des deux molecules apres une injection de 4 grammes de mout de fermentation dans une colonne de 250 ml. Enfin ce travail conclut sur le potentiel de la chromatographie de partage centrifuge en mode hydrostatique en chromatographie preparative, d'autant que par rapport a la cpc hydrodynamique, elle dispose d'appareils dont la colonne depasse 10 litres de volume. Le fait que, contrairement a la cpc hydrodynamique, la cpc hydrostatique puisse mettre en uvre n'importe quel systeme biphasique constitue un autre avantage de cette technique