thesis

Etude des voies de signalisation de la réparation de l'ADN chez Arabidopsis thaliana

Defense date:

Jan. 1, 2008

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Authors:

Abstract EN:

Plants are continuously exposed to DNA damage. According to the kind of damage, plants have to activate specific signaling pathways that are well conserved through the evolution. Our work first allowed us to reveal an AtRNR specific one marker of DSB repair pathway which expression is ATM and AtE2Fa dependant, the AtRNR2-3 bis gene. A replicative stress marker gene was also identified, the AtTSO3 gene, coding for a TCX protein expressed in the nuclear. A model of transcriptional regulation mediated by ATR in response to replicative stress was established with the AtRNR2-3 and AtRNR2-5 genes. The expression of the last example is dependant on the RAD9 and RAD17 proteins. Concurrently, to visualize in planta the expression of GUS reporter gene conducted by candidate gene promoters, in DNA damage response, we have developed a new non-invasive approach by MRI (Magnetic Resonance Imaging) in Arabidopsis thaliana. These different approaches will allow us to better understand the DNA repair signaling in plants trough the development.

Abstract FR:

Les plantes sont constamment exposées à des dommages de l’ADN. Selon le type de dommages, la plante va activer des voies de signalisation spécifiques qui sont, d’ailleurs, globalement conservées au cours de l’évolution. Les travaux de cette thèse ont permis dans un premier temps de déterminer parmi les gènes AtRNR un marqueur des cassures double-brin dépendant de la voie de signalisation ATM, le gène AtRNR2-3bis dont l’expression est dépendante du facteur de transcription AtE2Fa. Un marqueur d’un stress réplicatif dépendant de la voire ATR a également été identifié, il s’agit du gène AtTSO3 codant pour une protéine TCX, dont la localisation est nucléaire. Un schéma de régulation de l’expression des gènes suite à un stress réplicatif et dépendante de la kinase ATR a de plus été établi faisant intervenir les autres gènes codant pour des sous-unités R2 de la RNR, les gènes AtRNR2-3 et AtRNR2-5. L’expression de ce dernier est, par ailleurs, dépendante des protéines RAD9 et RAD17. Enfin, dans le but de visualiser in planta l’expression de ces gènes au cours du développement, des images IRM de plantules d’Arabidopsis thaliana, la synthèse et les tests in vitro des substrats de l’enzyme b-glucuroninase ont été réalisés. Les résultats obtenus ont apporté de nouveaux éléments dans la connaissance de la régulation transcriptionnelle de gènes de la réparation, notamment dans la voie de signalisation ATR. Afin de suivre leur expression, au cours du développement, par IRM différents outils ont également été mis au point et les premiers essais in vitro sont très encourageants