La phosphodiestérase photo-activable : rôle dans la phototransduction pinéale et nouvelles cibles de ses sous-unités régulatrices dans les tissus non-photosensibles
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La glande pineale de poulet constitue un modele de phototransduction extra-retinienne. Sa photosensibilite directe se manifeste, in vitro, par un effet inhibiteur de la lumiere sur la synthese de melatonine, neurohormone impliquee dans la regulation du cycle circadien de repos/activite et des cycles saisonniers de la reproduction. Afin de preciser le mecanisme de cette inhibition, nous avons recherche la phosphodiesterase 6 (pde6, effecteur primaire de la cascade de phototransduction retinienne) dans la glande pineale de poulet. Nous mettons en evidence, dans cet organe : (1) les transcrits codant les sous-unites catalytiques et regulatrices des pde6 de type cone et batonnet ; (2) un rythme nycthemeral des transcrits codant les sous-unites catalytiques ; (3) une activite enzymatique pde6, ainsi que la proteine pde6 de type batonnet ; (4) dans l'organe pineal isole in vitro, l'activite de la n-acetyltransferase, enzyme limitante de la voie de synthese de la melatonine, est protegee de l'inhibition par la lumiere en presence d'inhibiteurs des pde5/pde6. Cet ensemble de resultats suggere que la pde6 est sur la voie de phototransduction conduisant a l'inhibition de la synthese de melatonine. Nous avons egalement detecte le transcrit codant la sous-unite regulatrice de la pde6 de type batonnet (p-batonnet) dans un grand nombre de tissus non-photosensibles, chez le poulet et le rat. Un criblage en double-hybride d'une banque d'adnc de cerveau de rat a ete realise afin d'identifier les partenaires extra-retiniens de p-batonnet : nous avons isole l'extremite c-terminale de la proteine fbp17, essentiellement constituee d'un domaine sh3. Notre analyse par mutagenese dirigee montre que l'interaction p-batonnet / fbp17 fait intervenir