Etude des familles de Glycoside-Hydrolases GH16, GH17 et GH55 dans la morphogénèse pariétale du pathogène opportuniste, Aspergillus fumigatus
Institution:
Sorbonne Paris CitéDisciplines:
Directors:
Abstract EN:
The fungal cell wall is an outer and robust layer mainly composed of polysaccharides, which protects the fungal cell from its environment, mediates cell-cell interaction, and is responsible for the shape of the cell. The cell wall of the opportunistic pathogen Aspergillus fumigatus is essentially composed of ß(1,3)glucan which is synthesized at the plasma membrane by a transmembrane complex and then modified in the cell wall space by branching, cross-linking and degradating activities. The cell wall is a highly dynamic structure, which undergoes constant change during cell division, growth and morphogenesis. In this study, we investigated the role of three glycoside-hydrolases families (GH16, GH17 and GH55) in cell wall remodeling of this fungal pathogen by different approaches. Transglycosidase and glucanase activities of respectively AfCrh5p and AsScw11p have been studied by using recombinant proteins and the first crystal structure of the Crh family have been resolved. Furthermore, complete deletion of each family's genes has been performed to study the biological function of these enzymes and highlighted a multi-faceted role of this glycosides-hydrolases in the morphogenesis of the filamentous fungus, A. fumigatus.
Abstract FR:
La paroi cellulaire fongique est une couche externe et robuste composée principalement de polysaccharides, qui protège la cellule fongique de son environnement, médie l'interaction cellule-cellule et est responsable de la forme de la cellule. La paroi cellulaire du pathogène opportuniste Aspergillus fumigatus est essentiellement composée de ß(1,3)glucane qui est synthétisé au niveau de la membrane plasmique par un complexe transmembranaire puis modifié dans l'espace pariétal par des activités de ramification, de réticulation et de dégradation. La paroi cellulaire est une structure hautement dynamique qui subit des changements constants au cours de la morphogenèse fongique. Dans cette étude, nous avons étudié le rôle de trois familles de glycoside-hydrolases (GH16, GH17 et GH55) dans le remodelage du ß(1,3)glucane la paroi cellulaire de ce pathogène fongique par différentes approches. Les activités transglycosidase et glucanase respectivement de AfCrh5p et AsScw11p ont été étudiées en utilisant des protéines recombinantes et la première structure cristallographique de la famille Crh a été résolue. D’autre part, une délétion complète des gènes de chaque famille a été réalisée pour étudier la fonction biologique de ces enzymes et a mis en évidence un rôle à de multiples facettes de ces glycosides-hydrolases dans la morphogenèse du champignon filamenteux, A. fumigatus.