Marquage de peptides et leucotriènes : étude d'une nouvelle méthode de marquage non radioactive : marquage de leucotriènes au carbone 14
Institution:
Paris 11Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
Recently, the use of tricarbonyl chromium clusters, coupled with FT-IR spectroscopy detection has been successfully applied to the labelling of steroïd hormones. We studied the possibility of labelling peptides and leukotrienes with hexacarbonyl dicobalt clusters. From the appropriate acetylenic precursors, we synthetized the following neurokinin A and substance P complex derivatives: [Nle Co2(co6)]11-SP,[Nle Co2(CO)6]10-NKA and [Lys Co2(C0)6 ]2-NKA. These complexes were proved to be detectable by IR-spectrometry at concentrations of 10-12moles. Biological studies have shown that this labelling technique may be interesting when used on appropriate conditions. Similarly, we prepared the hexacarbonyl dicobalt complexes of peptidoleukotrienes LTE4 and LTC4, from dehydro-14, 15 LTA4. Biological studies are underway to evaluate the activity of these leukotrienes complexes. Moreover, for studies of peptidoleukotrienes metabolism in biological systems, we developed a total synthesis of LTC4, specifically labeled with carbon 14 on the cysteïnyl carbonyl with a specific activity of 50 mCi/mM, starting from natural glutathione labeled with carbon 14.
Abstract FR:
L’utilisation récente de complexes du chrome tricarbonyle, associée à une détection par infra-rouge à Transformée de Fourier, a pu être appliquée avec succès au marquage de certaines hormones stéroïdiques. Nous avons donc décidé d’étudier la possibilité de marquer des peptides et des leucotriènes par du dicobalt hexacarbonyle. A partir des précurseurs acétyléniques correspondants, nous avons synthétisé les dérivés complexés de la neurokinine A et de la substance P suivants [Nle Co2(C0)6]11SP, [Nle C02(C0) ]10NKA et [Lys C02 C04)]2NKA. Ces composés, très stables dans le faisceau IR, ont prouvé qu’ils pouvaient être détectés par infra-rouge à Transformée de Fourier à des concentrations de l’ordre de 10-12 moles. Les études biologiques ont montré que si cette méthode de marquage restait très intéressante, elle ne pouvait être appliquée à la famille des peptides que sous certaines conditions. Nous avons de même préparé certains complexes de dérivés des peptidoleucotriènes LTE4 et LTC4 à partir de déhydro-14,15 LTA4. Les études biologiques sont en cours afin d’évaluer l’activité de ces leucotriènes complexes et l’application d’un tel marquage. Parallèlement à ce travail et afin de résoudre certains problèmes rencontrés dans l’étude du métabolisme des peptidoleucotriènes dans les systèmes biologiques, nous avons développé une synthèse totale de LTC4, spécifiquement marqué au carbone 14 sur le carbonyle de la cystéïne avec une activité spécifique de 50 mCi/mM, ce qui a nécessité la préparation du glutathion naturel marqué au carbone 14.