Régulation de l'expression du gène de l'aromatase dans les cellules testiculaires de rat
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Abstract EN:
The androgens / estrogens balance is essential for normal sexual development and reproduction in mammals. In the testis, maintenance of this balance is controled by aromatase activity. Indeed, aromatase, encoded by the cyp19 gene catalyses the androgens conversion into estrogens. In rat testis, aromatase is constitutively expressed and is mainly regulated by the proximal promoter PII. However we have demonstrated that two other promoters are involved in the regulation of aromatase gene expression: the PI. F, described initially in brain and a new promoter called PI. Tr (testis rat promoter). In addition we have shown that the expression of the transcripts issued from these three different promoters in the whole rat testis change according to the age of animal and to the cells studied. Indeed, the promoter PII is used by Leydig, Sertoli and germ cells, the PI. F by Leydig and germ cells and the PI. Tr by germ cells and Sertoli cells but starting from the age of 20 days. The regulation of aromatase gene expression is controled by numerous factors. We have determined on which promoter(s) these factors act by 1) RT-PCR via the measurement of each transcripts in purified rat Sertoli and germ cells treated or not by these factors and 2) by transient transfections of mouse Sertoli cells lines (TM4) and of rat purified Sertoli cells with constructs containing PII or PI. F or PI. Tr sequence. We have also shown that PII and PI. Tr promoters have been up-regulated by cAMP and that steroids control PI. F activity.
Abstract FR:
L’équilibre entre les androgènes et les estrogènes est essentiel pour le bon déroulement de la spermatogenèse chez les mammifères. Dans le testicule, le maintien de cet équilibre est assuré par l’aromatase. Cette enzyme codée par le gène cyp19 catalyse la conversion des androgènes en estrogènes. Dans le testicule de rat, l’aromatase, constitutive, est principalement régulée par le promoteur PII. Cependant nous avons mis en évidence l’implication de deux autres promoteurs: le promoteur PI. F, initialement décrit dans le cerveau et un nouveau promoteur appelé PI. Tr (testis rat promoteur). Leur utilisation varie en fonction de l’âge de l’animal et du type cellulaire étudié : le PII est utilisé par les cellules de Leydig, de Sertoli et germinales, le PI. F par les cellules de Leydig et germinales et le PI. Tr par les cellules germinales et de Sertoli mais seulement chez des animaux à partir de 20 jours. De nombreux facteurs sont impliqués dans la régulation de l’expression du gène de l’aromatase. Nous avons voulu déterminer sur quel(s) promoteur(s) agissaient certains de ces facteurs d’une part en estimant par RT-PCR semi quantitative les taux des différents transcrits de l’aromatase dans des cellules primaires de rat (cellules germinales et de Sertoli) traitées ou non par ces facteurs et d’autre part par des transfections transitoires d’une lignée de cellules sertoliennes de souris (TM4) et de cellules de Sertoli purifiées de rat avec des constructions contenant la région promotrice du PII ou du PI. F ou du PI. Tr. Nous avons alors montré que les promoteurs PII et PI. Tr étaient régulés positivement par le dbAMPc et que les stéroïdes contrôleraient l’activité du promoteur PI. F.