thesis

Caractérisation de la réponse au stress acide chez Lactococcus lactis

Defense date:

Jan. 1, 2004

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Institution:

Caen

Directors:

Abstract EN:

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Abstract FR:

Afin d'élargir nos connaissances sur les mécanismes moléculaires impliqués dans la réponse au stress acide chez L. Lactis MG1363, la caractérisation de l'ATR (pour Acid Tolerance Response) ainsi que celle de mutants résistants au stress acide - affectés dans les gènes guaA (codant la GMPsynthase), relA (codant la (p)ppGpp synthase) et pstS (codant une sous-unité du transporteur à haute affinité du phosphate) - a été entreprise. Deux approches ont été utilisées : la caractérisation protéomique visant à identifier les protéines impliquées dans la réponse au stress acide de L. Lactis, et la caractérisation du rôle de composants pariétaux dans la résistance au stress acide des mutants. La caractérisation protéomique de l'ATR en milieux complexe et chimiquement défini ainsi que celle des mutants guaA, relA et pstS révèlent la sur-expression de 193 protéines, dont 174 ont été identifiées, correspondant à 91 protéines différentes. Une analyse transcriptionnelle ainsi qu'une mutagenèse ciblée ont été réalisées sur certains des gènes correspondants. Nos résultats suggèrent, pour certaines de ces protéines, qu'elles ont une importance majeure dans la tolérance à l'acidité de L. Lactis. Le rôle de composants pariétaux dans la réponse au stress acide de L. Lactis a été évalué en inactivant les gènes pbp (pour penicillin binding protein) dans la souche sauvage et dans le mutant guaA. La survie des mutants correspondants en condition de stress acide suggère que la biosynthèse de la paroi participe à la tolérance au stress acide de L. Lactis.