Interaction et activation différentielles des petites protéines G de la famille rho par p210bcr-abl et p190bcr-abl
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Abstract EN:
The Philadelphia chromosome associated with several leukaemia results a reciprocal translocation between the Abl gene on chromosome 9 and the Bcr gene on chromosome 22. Depending on locations of the breakpoint on the BCR genome, there are two alternative forms of BCR-ABL: p210bcr-abl, found in chronic myelogenous leukemia (CML), and p190bcr-abl, found in acute lymphocytic leukemia (ALL). The only difference between both forms of Bcr-Abl is the absence of the DH domain of Bcr in the form p190bcr-abl. The present work showed interactions and activation of Rho family GTPases by Bcr-Abl thanks to techniques of coimmunoprecipitation, pull-down, GEF activity and confocal microscopy. We can demonstrate that p210bcr-abl interacts and activates RhoA, Rac1 and Cdc42. In spite of the lack of a GEF domain, the p190bcr-abl is able to activate Rac1 and Cdc42. This GEF activity from p190bcr-abl seems to come from partners associated like Vav protein having an GEF activity from Rac1 and Cdc42. We showed the Vav protein presence in complex in the form activated with Bcr-Abl. In contrast, p210bcr-abl is able to activate directly RhoA by the GEF domain of Bcr. These results allowed to set up a model of development of leukaemia Philadelphia chromosome, in which Rac1 and Cdc42 activated by p190bcr-abl and p210bcr-abl are implicated in the cellular transformation (in inhibition of apoptosis, cell motility and proliferation). Whereas the specific activation of RhoA by p210bcr-abl regulated the myeloid cell differentiation, that is the characteristic during the chronic phase of the CML.
Abstract FR:
Le chromosome Philadelphie associé à certaines leucémies résulte d'une translocation chromosomique réciproque t (9 ; 22) mettant en phase les gènes Bcr et Abl. Selon le point de cassure dans le gène Bcr, différentes protéines chimériques sont produites, p210bcr-abl responsable de la Leucémie Myéloi͏̈de Chronique (LMC) et p190bcr-abl responsable de la Leucémie Aigüe Lymphoblastique (LAL). La seule différence entre les deux formes de Bcr-Abl est l'absence du domaine DH de Bcr dans la forme p190. Il s'agit d'un domaine d'homologie avec le domaine Dbl, un facteur d'échange pour les GTPases de la famille Rho. Nous avons pu montrer que la chimère p210bcr-abl est capable de lier et d'activer les trois GTPases RhoA, Rac1 et Cdc42. La chimère p190bcr-abl, malgré l'absence du domaine GEF, est capable d'activer Rac1 et Cdc42. Cette activité facteur d'échange observée pour p190bcr-abl semble provenir de partenaires associés à la fois à p210bcr-abl et à p190bcr-abl comme la protéine Vav possédant une activité facteur d'échange pour Rac1 et Cdc42. En revanche, p210bcr-abl est capable par son domaine GEF d'activer directement la petite protéine G RhoA. Ces résultats nous ont permis de mettre en place un modèle hypothétique de régulation de l'activité de ces GTPases par Bcr-Abl au sein des deux pathologies.