Abstract FR:

La 12-desaturase, enzyme localisee dans la membrane du reticulum endoplasmique des cellules vegetales, est responsable de la desaturation de l'acide oleique en acide linoleique. Afin d'etudier les interactions enzyme - substrat et de contribuer a l'elucidation du mecanisme moleculaire de la desaturation des acides gras, nous avons utilise une approche chimique qui consiste a incuber des cellules entieres d'une microalgue verte, c. Sorokiniana, en presence d'acides gras soufres, analogues structuraux du substrat vrai de l'enzyme. L'inhibition regiospecifique de la desaturation de l'acide oleique et l'oxydation regio- et stereoselective des 12- et 13-thiaoleates en sulfoxydes correspondants nous ont permis de mettre en evidence un transfert d'oxygene du site actif de l'enzyme sur l'atome de soufre lorsque l'abstraction des hydrogenes n'est pas possible. L'analyse stereochimique de tels sulfoxydes aliphatiques chiraux et quasi symetriques a ete realisee par rmn #1h et #1#3c, en utilisant des nouveaux reactifs de deplacements chimiques de la famille des acides arylmethoxyacetiques. A la suite de cette etude fondamentale et au vu de la capacite des cellules entieres de c. Sorokiniana a oxyder des composes soufres, les conditions d'incubation ont ete optimisees (temperature, etat de croissance de l'algue, concentrations des substrats) dans le but d'utiliser cette microalgue comme biocatalyseur d'oxydations asymetriques. La comparaison des resultats d'oxydation in vivo de divers thioethers (influence de la lipophilie, des effets stereoelectroniques) en terme de rendements de conversion, d'exces enantiomeriques et de stereochimie nous permettra d'envisager la modelisation du site actif de l'enzyme responsable de l'oxydation (monooxygenase a flavine ou a cytochrome p450).