Abstract FR:

L'existence d'un processus d'excision-epissage alternatif et d'edition de l'arn messager augmente la diversite dans la sous-classe des recepteurs de type ampa (glur-a, b, c et d) du glutamate. Ces differentes formes ont des consequences fonctionnelles sur la transmission synaptique et affectent les proprietes de ces recepteurs. Mon travail de recherche porte sur l'etude de la regulation du processus d'excision-epissage alternatif avec pour objectif l'identification de facteurs agissant en cis ou trans et modulant l'expression des formes flip et flop alternatives au cours de la differenciation cellulaire neuronale induite experimentalement. J'ai etudie l'expression des arnm des quatre sous-unites des recepteurs ampa dans les cellules pc12 et sh-sy5y non-differenciees, et recherche si elle etait modifiee au cours de la differenciation induite par ngf ou l'acide retinoique respectivement. Les cellules sh-sy5y expriment les quatre sous-unites et presentent une regulation de l'expression des differentes formes au cours de la differenciation neuronale. L'isolation des genes humains des sous-unites ampa et la comparaison de leurs sequences a revele une similitude de sequence dans les exons et les regions introniques bordant ces exons. Les sequences exoniques alternatives flip et flop possedent une region riche en purines localisee dans l'extremite 3' dont j'ai montre le role dans la regulation de l'excision-epissage en introduisant des mutations ponctuelles dans ces regions de la sous-unite glur-b. Grace a une serie d'experiences de deletions des sequences introniques, deux regions importantes pour la regulation de l'epissage ont ete identifiees dans les introns. Deux positions differentes dans les sequences des sous-unites des recepteurs de type ampa presentant la possibilite d'etre editees et provoquant des modifications fonctionnelles ont ete mises en evidence. Je me suis interessee au site appele r/g dont j'ai etudie l'evolution du taux d'edition dans les cellules sh-sy5y dans les conditions normales de culture et lors de la differenciation induite par l'acide retinoique. Aucune modification significative du degre d'edition du site r/g au cours de la differenciation cellulaire pour aucun des sous-types glur-b, -c, et -d flip n'a ete observee.