Etude de l'association entre l'acétylcholinestérase et sa protéine d'ancrage membranaire "PRiMA"
Institution:
Paris 5Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
The nervous tissue and muscles of mammals express the T splice variant of acetylcholinesterase (ACHET), associatied with anchoring proteins, ColQ and PRiMA, producing respectively collagen-tailed forms and membrane-bound tetramers. These interactions are important since they condition the functional anchoring of AChE in cholinergic tissues. The collagen-tailed forms are inserted in the basal lamina at neuromuscular junction, while the membrane-bound tetramers are anchored at the cell surface through the transmembrane domain of PRiMA. The membrane-bound tetramers represent the major enzyme species in the brain. The association of AChEr subunits with ColQ has been extensively studied : it is based on an tight interaction between four t peptides and a praline-rich motif, called PRAD ("Proline-Rich Attachment Domain"), located in the N-terminal region of ColQ. The association of AChEj subunits with PRiMA appears similar because this transmembrane protein also contains a proline-rich motif, but there are significant differences in the number of pralines (8 in ColQ, 14 in PRiMA) and in the number and positions of cysteines that might form intercatenary disulfide bonds with the cysteine located near the C-terminus of the t peptides. Therefore, we have undertaken an analysis of the association of AChET with PRiMA. Using deletions and point mutations in PRiMA, we defined a minimal motif in PRiMA, which could associate with AChEr subunits.
Abstract FR:
Le système nerveux et les muscles des mammifères expriment le variant T de l'acétylcholinestérase (AChET), associé à des protéines d'ancrage ColQ et PRiMA produisant respectivement des formes avec des queues collagéniques et des tétramères membranaires. Les formes collagéniques sont ancrés dans la lame basale de la jonction neuro-musculaire, tandis que les tétramères membranaires sont ancrés à la surface cellulaire par le domaine transmembranaire de PRiMA. Les tétramères membranaires constituent la forme majoritaire de l'enzyme dans le cerveau. L'association de l'AChET avec ColQ a été bien étudiée : elle est basée sur l'interaction de 4 peptides t avec un motif riche en pralines, appelé PRAD ("Proline-Rich Attachment Domain"), localisé dans la région N-terminale de ColQ. L'association de l'AChET avec PRiMA paraît similaire puisque cette protéine transmembranaire contient aussi un PRAD, mais qui est significativement différent par le nombre de pralines (8 dans ColQ, 14 dans PRiMA) et par le nombre et positions des cystéines qui peuvent former des ponts disulfures avec les cystéines C-terminales des peptides t. Donc, nous avons analysé l'association de l'AChET avec PRiMA. En effectuant des délétions et des mutations dans PRiMA, nous avons défini un motif peptidique, suffisant pour l'interaction avec les sous-unités AChET.