Identification et caractérisation de protéines impliquées dans la dissémination du mélanome : rôle de l'Annexine A1
Institution:
Clermont-Ferrand 1Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
Proteins involved in melanoma dissemination have been studied and protein profiles of two genetically similar melanoma cell lines have been compared. Both B16F10 and B16B16 cells induced primary tumours after subcutaneous graft, but pulmonary metastases were observed only in mice bearing B16B16 melanoma. Among the 37 identified proteins, we focused on Annexin A1 (ANXA1) which expression increased in both B16B16cell culture and tumours. This protein is involved in leukocyte migration and extravasation, particularly by its binding to the formyl peptide receptor (FPR). Here, using RNA interference strategies, we have shoxn that ANXA1 reduction decreased both in vitro cell invasion and metastasis formation in mice. Moreover, treatment of B16B16 cells by fMLP (FPR agonists) or by ANXA1 N-terminal peptide enhanced cell invasion and MMP9 secretion. ANXA1-FPR binding, usually involved in leukocyte regulation, should also contribute to melanoma dissemination processes. This is partly confirmed by a retrospective study in human primary tumours, showing that ANXA1 expression increased 6 fold the metastasis risk. We have also shown that Syntenin, an adaptater protein, was more present in B16F10 secretomes. Intracellular Syntenin was previously described as a marker for melanoma aggressiveness. Its extracellular localisation should protect melanoma cells from invasion, probably by reinforcing cell-cell adhesion or cell-matrix adhesion.
Abstract FR:
Nous avons voulu identifier et caractériser des protéines jouant un rôle dans la formation des métastases du mélanome cutané. Pour ce faire, nous avons réalisé des comparaisons protéomiques de deux lignées génétiquement semblables : B16F10 et B16B16, qui induisent toutes deux la formation d'une tumeur primitive, alors que seules les tumeurs B16B16 génèrent des métastases. Parmi les 37 protéines différentielles identifiées, l'Annexine A1 (ANXA1) est plus exprimée dans les cellules et les tumeurs B16B16. Cette protéine est impliquée dans de nombreuses régulations cellulaires, notamment dans la migration et l'extravasation des neutrophiles en se fixant sur les récepteurs aux peptides formylés (FPR). Nous montrons que la diminution du taux d'ANXA1 par ARN interférents entraîne la réduction de la capacité invasive des cellules B16B16 in vitro, et du nombre de métastases in vivo. Des peptides, soit agonistes des FPR (fMLP), soit correspondants à la région N-terminale d'ANXA1, stimulent l'invasion et la sécrétion de MMP9 des cellules B16B16. L'axe ANXA1-FPR, habituellement rencontré dans les lignages myélocytaires, pourrait participer au processus de dissémination du mélanome. Cette hypothèse est en partie corroborée par une étude rétrospective montrant que la présence d'ANXA1 dans les tumeurs primitives humaines est associée à un risque de métastases 6 fois plus élevé. Nousavons également montré que la Synténine, habituellement intracellulaire et favorisant la dissémination du mélanome, est significativement plus sécrétée dans les surnageants des cellules les moins agressives, B16F10. Elle interagirait avec des protéines d'adhésion, renforçant ainsi les liens matrice-cellules ou cellules-cellules.