Contrôle pharmacologique de l'expression d'un transgène au niveau traductionnel
Institution:
Toulouse 3Disciplines:
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Nous avons conçu un nouveau procédé de contrôle externe permanent et modulable de l'induction de l'expression d'un gène dans des cellules en culture par modulation de l'état de prénylation d'une protéine de fusion inductrice de la traduction dudit gène : L' expression d'une protéine de fusion R17-4G entre la protéine R17 de liaison à l'ARN et le facteur d'initiation de la traduction eIF4G peut diriger la traduction du deuxième cistron d'un ARN messager bicistronique contenant dans l'espace intercistronique le site de liaison de la protéine R17. Un traitement pharmacologique par un inhibiteur de prényl transférase est capable de contrôler l'état de prénylation, et l'activité traductionnelle, de protéines de fusion R17-4G-CAAX contenant des domaines de prénylation CAAX. L'expression conditionnelle, par ce système, d'un transgène dans des cellules eucaryotes, conduit à la production d'une protéine détectable par western-blot et dont on peut étudier les effets biologiques.