La dynamique de la chromatine en réponse aux cassures double-brin d'ADN
Institution:
Toulouse 3Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
DNA double strand breaks (DSBs) are a major threat to chromosome integrity and cell survival, repairing them is crucial. Repair begins with binding of the Ku70-Ku80 complex (Ku) to protect the exposed DNA ends until a repair pathway is chosen. Ku promotes the direct resealing of breaks by non-homologous end joining (NHEJ) but is error-prone. The most precise repair pathway is the replacement of the broken segment with an intact copy by homologous recombination (HR). The DNA end resection, which generates 3' single stranded DNA tails (ssDNA), is a critical step for initiating HR, and is followed by the homology search. Resection is the result of the helicase, endo and exonuleolytic activities of various factors, previously identified. During this dissertation, I focused on studying the resection dynamics and the chromatin movements that accompany and follows this step. This study, led on single living cells, was allowed after the developing of a compact fluorescent DNA labeling system
Abstract FR:
Les cassures double brin d'ADN (DSBs) sont une menace majeure pour l'intégrité des chromosomes et la survie des cellules qui réagissent en déclenchant des voies de réparation. Toute réparation commence par la fixation du complexe formé par Ku70-Ku80 (Ku) qui protège les bouts de la DSB. Ku favorise la religature rapide des bouts de la cassure qui est sujette aux erreurs. La réparation la plus précise se fait par recombinaison homologue (HR). La résection de l'ADN prépare les bouts d'ADN à entamer une HR, elle génère de l'ADN simple brin (ssDNA) et est suivie par la recherche de la séquence homologue. La résection est la résultante de l'activité hélicase, endo et exonucleolytique de facteurs ultérieurement identifiés. Pendant ma thèse, j'ai étudié la dynamique de la résection, ainsi que les mouvements de la chromatine pendant et après ce processus. Cette étude, menée sur des cellules uniques et in vivo, a été permise après avoir développer une nouvelle technique de marquage fluorescent d'ADN