Etude de la réplication du baculovirus d'"Autographa californica" (AcMNPV) dans une nouvelle lignée cellulaire de "Spodoptera frugiperda" cultivée à 37 C (Sf9-HT) : application d'un tel système
Institution:
Montpellier 2Disciplines:
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Il y a une quinzaine d'annees, l'utilisation des baculovirus, virus infeodes aux arthropodes, ouvrait de nouveaux horizons en lutte biologique contre de nombreux insectes ravageurs. Depuis, la mise en place de culture de cellules d'insectes ainsi que l'etude de son genome ont fait de lui un candidat serieux en tant que vecteur d'expression. Desormais, le systeme baculovirus/cellules d'insectes est couramment employe pour la production de proteines recombinantes. Cet interet massif pour un tel systeme- au detriment des systemes deja connus employant des bacteries, des levures ou des cellules de mammiferes- est lie aux nombreux avantages qu'il propose : production de proteines recombinantes en grande quantite, modifications post-traductionelles correctes, production dans des milieux depourvus de serum de veau fetal et surtout un virus non pathogene pour l'homme. Toutefois, la majorite des proteines recombinantes synthetisees sont d'origine humaine, ou plus generalement issues de mammiferes. De plus, le baculovirus est depuis peu envisage comme vecteur de gene pour la therapie genique. En appliquant des conditions de cultures de cellules de mammiferes aux cellules d'insectes, nous pourrions ainsi ameliorer la qualite, et peut-etre la quantite des proteines synthetisees. Pour cela, nous avons donc tente d'obtenir une lignee de cellules d'insectes capable de se maintenir a 37c, ainsi qu'un baculovirus pouvant se repliquer dans ce nouvel environnement. Nous tenterons egalement de montrer les avantages d'un tel systeme ainsi que ses defauts. Le systeme baculovirus/cellules d'insectes classique pourrait etre ameliore en eliminant le probleme majeur qui est la lyse des cellules en fin de cycle viral. Nous utilisons pour cela un systeme dit stable utilisant certaines proprietes de genes provenant du virus.