Abstract FR:

Le complexe cycline c-cdk8 peut s'associer, dans differents complexes plus larges, a la machinerie de transcription arn polymerase ii, depuis la levure jusqu'a l'homme. Si aucune evidence n'a ete apportee sur un role direct de ce complexe dans la regulation du cycle cellulaire, son implication dans le controle transcriptionnel est assez bien documentee chez la levure. Les travaux presentes ici permettent de montrer que, par des experiences de synchronisation, l'expression genique de cycline c est activee transitoirement par le serum et independamment du cycle cellulaire, dans des fibroblastes humains normaux primaires ; cependant, les variations du niveau de messager cycline c ne sont pas accompagnees par des variations similaires des taux proteiques, suggerant des mecanismes de regulation supplementaires pour controler le niveau proteique de cycline c. En parallele, l'etude de la fonction de cycline c et de cdk8 dans la cellule, par une approche de surexpression, ont conduit a mettre en evidence un mecanisme original de regulation de la degradation de cycline c par cdk8. Ainsi un ensemble de resultats indique que la cycline c humaine exogene est tres instable, et qu'elle est fortement stabilisee par surexpression de la cdk8 humaine, avec un temps de demi-vie comparable a celui de la cycline c endogene. La stabilisation de la cycline c exogene par cdk8 se fait de facon specifique, dependante du niveau de surexpression de cdk8 et par un mecanisme indirect n'impliquant ni l'activite kinase de cdk8, ni une interaction stable avec cycline c. La cycline c exogene est principalement degradee par la voie du proteasome, apres ubiquitination. Enfin, la fonction de cycline c et cdk8 dans la regulation transcriptionnelle a ete abordee grace a deux systemes rapporteurs d'activation transcriptionnelle in vivo. Les resultats obtenus suggerent que l'activite kinase de cdk8 serait positivement impliquee dans l'activation transcriptionnelle liee a la proteine de fusion gal4-vp16.