Abstract FR:

L'apoptose, phénomène physiologique, joue un rôle central dans l'homéostasie tissulaire et participe naturellement à l'élimination de cellules potentiellement dangereuses comme les cellules tumorales. De plus, les traitements anti-cancéreux classiques vont non seulement tendre à diminuer la prolifération des cellules mais également à stimuler la machinerie apoptotique impliquant préférentiellement une voie mitochondriale. Une résistance aux traitements peut donc être attribuée à un défaut dans le programme apoptotique. Ce travail porte sur la compréhension des macaniqmes de résistance et de sensibilité à l'apoptose induite par les agents anti-cancéreux. Les Carcinomes Pulmonaires Non à Petites Cellules (NSCLC) sont résistants à l'induction de l'apoptose par les traitements anti-cancéreux classiques tels que l'Etoposide (VP16) ou les -radiations. Dans un premier temps, notre équipe a montré que les NSCLC sont néanmoins sensibles à l'induction de l'apoptose par un inhibiteur de protéines kinases à large spectre, la staurosporine (STS). Le premier objectif de ce travail a été d'évaluer les altérations mitochondriales au cours de l'apoptose induite par la STS. Ces travaux nous ont permis de montrer que dans les lignées U1810 NSCLC, la STS induit la libération mitochondriale des facteurs AIF et du cytochrome C, suivies par l'activation des caspases, la condensation nucléaire, la fragmentation de l'ADN et, finalement, la mort cellulaire. Bien que la pré-incubation des lignées U1810 avec un inhibiteur de caspases à large spectre, le z-VAD. Fmk, retarde l'apoptose induite par la STS, il n'empêche ni les altérations mitochondriales, ni la mort cellulaire. L'évaluation du rôle du facteur AIF dans l'apoptose induite par laSTS a révélé, suite à l'immunodéplétion d'AIF, que les cytosoles issus des lignées U1810 traités à la STS avaient perdu leur capacité à induire la condensation nucléaire de noyaux isolés. En outre, bin que la surexpression d'AIF par transfection ne soit pas suffisante pour induire la mort, elle favorise l'apparition de phénotypes apoptotiques dépendants de la STS. Enfin, l'extinction de la production de la protéine AIF par la technique de RNA interférence protège de l'apoptose induite par la STS. L'activation des caspases est donc suffisante pour induire la mort des U1810 et la voie AIF indépendante apparaît avoir un rôle prépondérant dans l'apoptose de ces mêmes lignées. Les voies apoptotiques mitochondriales jouent un rôle central dans la mort des U1810. Dans un deuxième temps, notre équipe amontré que la lamellarine D (Lam-D), un alcaloïde marin inhibiteur de topoisomérase I, cible directement les mitochondries de cellules tumorales afin d'induire l'apoptose. La Lam-D induit précocement la rupture du potentiel de membrane mitochondrial (m ) dans les lignées leucémiques P388. Ces altérations fonctionnelles sont protégées par la cyclosporine A (CsA), un inhibiteur du pore de transition de perméabilité (MPT), mais pas par l'inhibiteur de caspases, le z-VAD. Fmk. La rupture du m est associée au gonflement des mitochondries et à la libération du cytochrome C. De plus, nous avons démontré que la Lam-D a un effet inducteur du MPT et que les mitochondries sont nécessaires, dans un système acellulaire d'apoptose, à l'induction de l'apoptose nucléaire Lam-D dépendante. Enfin, un analogue actif de la Lam-D, le PM031379 exerce un effet pro-apoptotique direct sur les mitochondries, effet plus prononcé sur les mitochondries de lignées tumorales. Tous ces résultats renforcent les connaissances sur les carcinomes pulmonaires NSCLC et réitèrent l'intérêt pharmacologique des lamellarines ainsi que leur rôle potentiel dans le traitement des lignées cancéreuses chimiorésistantes.