Étude des mécanismes de contrôle de l'interaction syntenine-1 / syndecan-1
Institution:
Lyon 1Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
The intracellular PDZ domain-containing protein syntenin-1 functions as a scaffold protein that recruits multiple transmembrane and cytoplasmic partners to the signalling and cytoskeletal machineries. Particularly, syntenin-1 interacts with the EFYA sequence of the syndecan-1 receptor and the tyrosine residue (Y309) within this motif is essential for the interaction. The aim of our work was to analyze the potential role of this residue in the regulation of syntenin-1 binding to syndecan-1. By using a panel of syndecan-1 cytoplasmic mutants, we showed that this interaction depends on the phosphorylation level of the Y309. Further experiments with the full-length syntenin-1 or with its isolated or tandem PDZ domains demonstrated that the phosphorylation of the Y309 inhibits the PDZ binding. These results were confirmed by using EFYA peptides comprising a phosphorylated tyrosine residue. These data confirm the findings of our group, demonstrating that cell adhesion to the C-terminal domain of the laminin-332 triggers tyrosine-dephosphorylation of the syndecan-1. Moreover, syndecan-1 colocalize with syntenin-1 within cytoplasmic extensions of these cells suggesting a link between syntenin-1 and the syndecan-1 dependent membrane cytoskeleton organization. Indeed, these results were corroborated since cell spreading was prevented by siRNA assays abolishing syntenin-1 expression. Thus, phosphorylation of the EFYA sequence seems to play a role in the regulation of syntenin-1 recruitment affecting by this way the related signalling pathways
Abstract FR:
La synténine-1 est une protéine intracellulaire comportant des domaines PDZ. Par ces domaines, elle établit des liaisons multiples avec des partenaires transmembranaires et cytoplasmiques qu’elle relie aux cascades de signalisation ou au cytosquelette. Notamment, elle interagit avec la séquence EFYA du récepteur syndécan-1, la tyrosine (Y309) de ce motif étant indispensable pour l’interaction. Notre objectif a été d’analyser le rôle potentiel de l’état de phosphorylation de ce résidu dans la régulation de la liaison synténine1-syndécan1. Nous avons montré, en utilisant une série de mutants du domaine cytoplasmique du syndécan-1, que l’interaction synténine1-syndécan1 dépend de l’état de phosphorylation d’Y309. Nos expériences menées avec la synténine-1 entière ou avec ses domaines PDZ, isolés ou en tandem, produits sous forme recombinante, ont permit de montrer que la phosphorylation de l’Y309 inhibe l’interaction. Ces résultats ont été confirmés par l’utilisation de peptides EFYA comportant une tyrosine phosphorylée. Nos résultats corrèlent avec les travaux du laboratoire montrant que l’adhésion cellulaire au domaine C-terminal de laminine-332 induit la déphosphorylation des tyrosines du syndécan-1. De plus, la colocalisation du syndécan-1 avec la synténine-1 dans les prolongements cytoplasmiques de ces cellules indique que cette dernière est recrutée dans ce processus. Nos expériences de siRNA confortent ces résultats puisque les cellules n’exprimant plus de synténine-1 sont incapables de s’étaler. La phosphorylation du motif EFYA joue donc probablement un rôle dans la régulation du recrutement de la synténine-1 influant ainsi sur les cascades de signalisation associées