Développement d'un vaccin immunocontraceptif : mise au point de tests immunologiques dans le modèle vulpin et développement de vaccins ADN avec les antigènes spermatiques fSP13 et fSP8
Institution:
Nancy 1Disciplines:
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Le but de ce travail était tout d'abord, la mise au point d'outils immunologiques permettant l'analyse de la réponse immune humorale et cellulaire chez le renard (Vulpes vulpes). Après avoir sélectionné des anticorps reconnaissant les différentes classes d'immunoglobuline de renard, le modèle antigénique ovalbumine et choléra toxine B a été utilisé pour mettre au point les techniques ELISA et ELISPOT. Quatre cytokines vulpines Il2, Il6, Il10 et INFy ont été clonées et séquencées, et une technique d'analyse de leur expression par RT-PCR quantitative, après re-stimulation antigénique in vitro de PBMCs vulpins a été mise au point. Par la suite, différents vaccins ADN utilisant le vecteur vaccinaI commercial pVAX1 et les antigènes spermatiques spécifiques du testicule fSP13 et fSP8 identifiés au laboratoire ont été construits. La fonctionnalité de celles-ci à tout d'abord été testée in vitro pour l'expression de fSP 13 et fSP8 après transfection de cellules MDCK.