Abstract FR:

Les processus reversibles de phosphorylation jouent un role clef dans la transduction des multiples signaux qui influencent le developpement des organismes vivants, notamment les signaux hormonaux. Le travail presente porte sur l'etude precoce des activites proteines kinases solubles dans les cellules de tabac (lignee by-2) en reponse a l'auxine. Nous avons d'abord montre que l'ajout d'auxine dans une suspension de cellules carencees en cette hormone induit une reprise de l'activite mitotique ainsi que des modifications importantes de divers parametres cellulaires comme les ph intra- et extra-cellulaires, la teneur en osmolytes et en arn messagers specifiques ou la morphologie des cellules. Une fois ce systeme biologique mis en place, nous avons analyse de maniere preliminaire les profils d'activites de phosphorylation variant precocement apres l'ajout d'auxine. Nous avons par la suite focalise notre approche sur la revelation d'activites de type map kinases. Devant l'absence de variation observable apres traitement auxinique, une optimisation poussee du protocole de revelation par renaturation des activites proteines kinases a ete realisee, grace au test de nombreuses conditions experimentales et a la recherche de temoins positifs d'activites map kinase. Nous avons pu montrer au cours de ces tests qu'un choc hyperosmotique est capable d'induire une activite kinase possedant les caracteristiques d'une map kinase. Nous avons finalement conclu que, contrairement a un resultat precedemment publie, l'auxine n'active pas une cascade map kinase au cours de la reprise des mitoses. La troisieme et derniere partie du travail etablit une correlation entre acidification du ph cytoplasmique par plusieurs acides faibles lipophiles et activation des map kinases.