Contribution de l'endoribonucléase G3BP dans le remodelage des particules ribonucléoprotéiques, ex vivo et in vivo, au cours du développement chez la souris
Institution:
Montpellier 2Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
From sites of transcription in the nucleus to of the cytoplasm, messenger RNAs are associated with RNA-binding proteins (RBP). These proteins influence pre-mRNA processing as well as the transport, localization, translation and stability of mRNAs. In our lab, we are interested in an RBP, G3BP, which behaves as an endoribonuclease responsible for mRNA degradation. During my thesis, we have demonstrated that phosphorylation of G3BP regulates its localisation and its function in translation. G3BP is hypo-phosphorylated in cells exposed to arsenite and is recruited to stress granules (SGs). Therefore, G3BP is likely to control the fate of mRNPs after recovery from stress. In order to determine the function(s) of G3BP in vivo, we have employed a gene deletion strategy in mice. All G3BP-/- mice show growth retardation and massive apoptosis of neurons in the central nervous system. Monitoring the global expression pattern, using Affymetrix oligonucleotide arrays, in isolated wild-type (WT) and G3BP knockout (KO) fibroblasts, we show that the expression of the growth arrest specific genes and imprinted genes was specifically increased in the absence of G3BP. The results demonstrate that G3BP is essential for proper embryonic growth and development by mediating the coordinate expression of multiple imprinted growth-regulatory transcripts
Abstract FR:
Les mRNP subissent divers remodelages dans la cellule nécessaires à leur localisation, traduction et dégradation. Parmi les composantes de certaines mRNP cellulaire, G3BP est une endoribonucléase capable de cliver spécifiquement les ARNm. Les travaux réalisés au cours de cette thèse ont permis d’établir que cette protéine est impliquée dans la régulation de la traduction de façon dépendante de son état de phosphorylation. Cette phosphorylation contrôle également sa localisation en réponse à un stress oxydatif. En effet, nos travaux montrent que G3BP, est une composante majeure des granules de stress (SG) induites par l’arsenite. Afin d’appréhender le rôle de G3BP in vivo, nous avons réalisé l’invalidation du gène G3BP par recombinaison homologue chez la souris et analysé ses conséquences phénotypiques sur deux fonds génétiques différents (129Sv et 129Sv/Balb-C). Nous avons, ainsi, pu démontré que G3BP est un gène important pour la prolifération cellulaire et la survie des neurones. Deux phénotypes sont, en effet, associés à l’absence de G3BP quelque soit le fond génétique: 1) un retard de croissance de toutes les souris G3BP-/-, 2) une mortalité neuronale massive par apoptose dans les diverses régions du système nerveux central (CNS). L’analyse du transcriptome des fibroblastes sauvages et KO par des puces Affymetrix, a révélé que l’absence de G3BP se traduit par une altération de l’expression de 53 gènes. Parmi ces gènes, deux groupes de gènes ont attiré notre attention : des gènes soumis à l’empreinte génomique et des gènes appelés growth arrest specific genes dont l’expression est souvent corrélée à un arrêt de prolifération