thesis

Les cytochromes P450 2A : purification d'une isoenzyme chez le singe et investigations chez l'homme

Defense date:

Jan. 1, 1994

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Institution:

Montpellier 2

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Abstract FR:

Nous avons purifie et caracterise (proprietes spectrales, catalytiques, immunologiques) deux nouvelles isoenzymes des familles de cytochromes p450 2a et 3a induites par le phenobarbital chez le singe (babouin). Les anticorps obtenus a partir de ces proteines nous ont permis de montrer que chez l'homme, dans un systeme in vitro d'hepatocytes humains en culture, le phenobarbital induit aussi les p450 2a. Grace a la mise au point d'une technique tres resolutive d'electrofocalisation suivi d'immunoblot, nous avons montre que seule la proteine humaine 2a6 (2 cdna 2a6 et 2a7 avaient ete clones) s'exprime dans le foie humain, ainsi que dans les hepatocytes humains en culture ou elle est induite par pb, mais aussi plus faiblement par la dexamethasone et la rifampicine (inducteurs classiques des cyp3a). Les mecanismes d'induction du 2a6 par ces 3 composes ne semblent pas identiques. De meme, seuls les mrna 2a6 sont visibles comme le montrent des experiences de transcriptions reserves suivies de pcr. Ceci suggere une expression nulle ou rare du gene 2a7 dans le foie humain. Par ailleurs, nous avons emis l'hypothese d'une surexpression du p450 2a6 dans le foie tumoral humain