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L’aminopeptidase B (Ap-B ), Zn2+-métalloexopeptidase de 72 kDa, hydrolyse les acides aminés basiques présents en NH2-terminal de peptides. In vivo, deux substrats ont été identifiés : le glucagon et la cholécystokinine 9. L’Ap-B possède également, in vitro, une activité résiduelle capable d’hydrolyser le leucotriène A4 en leucotriène B4. Dans l’attente de la détermination de la structure 3D de l’Ap-B, un modèle moléculaire de cette dernière a été construit par homologie avec la structure cristallographique de la LTA4 hydrolase. L’activité catalytique de l’Ap-B est sensible aux réactifs des groupements thiol, ce qui suggère une implication directe ou structurale des cystéines dans le mécanisme enzymatique. L’ensemble de ces résidus a été étudié par mutagenèse dirigée. 34 mutants ont été exprimés dans E. Coli, purifiés et caractérisés sur le plan enzymatique et structural. Un pont disulfure, régulant la reconnaissance des substrats par l’Ap-B, a été identifié par spectrométrie de masse.