Etude des mécanismes moléculaires mis en jeu dans la dégradation de la cycline E à l'aide des extraits d'oeufs de Xénope
Institution:
Montpellier 2Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
Cyclin E-null cells are resistant to the oncogenic transformation in vitro. Conversely, overexpression of cyclin E leads to high chromosomal instability correlated to initiation of replication defect. The aim of this project was to study molecular mechanisms implicated in the degradation of cyclin E and to characterize if cyclin E turnover is tied to its function in DNA replication. Even if cyclin E is described stable during early embryonic development in Xenopus, we observed that cyclin E is degraded during initiation of DNA replication. We shown that the pathways of cyclin E turnover are functional in Xenopus egg extracts and that F-box proteins Cdc4 and Skp2 required for cyclin E turnover via SCF complex are present in Xenopus egg extracts. In addition, we determine that there is a specificity of interaction between F-box protein and cyclin E dependant on cell cycle. This recognition is regulated both by differential phosphorylation of cyclin E and by modification of F-box proteins Skp2 and Cdc4
Abstract FR:
Les cellules déficientes en cycline E sont résistantes à la transformation oncogénique in vitro. A l'inverse, la surexpression de la cycline E provoque une instabilité chromosomique élevée qui peut être corrélée à un défaut d'initiation de la réplication. Ce travail avait donc pour but d'étudier les mécanismes moléculaires mis en jeu dans la dégradation de la cycline E et de déterminer si cette dégradation est liée à sa fonction dans la réplication. Alors que la cycline E était décrite comme stable au cours du développement précoce chez le Xénope, nous avons observé que la cycline E est dégradée au moment de l'initiation de la réplication dans les extraits d'œufs de Xénope. Nous avons donc pu déterminer que les voies de dégradation de cycline E sont fonctionnelles dans ce système acellulaire et que les protéines F-box Cdc4 et Skp2, impliquées dans la dégradation de la cycline E via le complexe SCF sont présentes dans les extraits. Par ailleurs, nous avons montré qu'il existe une spécificité d'interaction des F-box vis-à-vis de la cycline E dépendante du cycle cellulaire. Cette reconnaissance est régulée à la fois par des phosphorylations différentielles de cycline E et par modifications des protéines F-box Skp2 et Cdc4