Abstract FR:

Chez s. Cerevisiae, le glycerol, principal sous-produit de la fermentation alcoolique, a un role essentiel dans le maintien de la balance redox, et est d'autre part le principal solute compatible forme en reponse a un stress osmotique. L'augmentation de la production de glycerol a un interet pour l'amelioration de la qualite de certains vins. Ce travail a eu pour objectif une meilleure comprehension de la regulation de sa production en nologie et la construction de souches surproductrices de glycerol optimisees. L'etude de l'expression des genes gpd1 et gpd2, codant pour les isoformes de la glycerol-3-phosphate deshydrogenase (gpdh) a montre un role majeur de gpd1, implique dans la reponse osmotique. Alors que l'amplification de la gpdh dans une souche modele conduit a une surproduction importante de glycerol, nous avons montre que la deuxieme etape de synthese n'etait pas limitante. L'expression d'un canal de sortie du glycerol ouvert de facon constitutive permet une surproduction de glycerol, mais altere considerablement les proprietes fermentaires de la souche. Le gene gpdi a ete surexprime dans six souches commerciales et a conduit a une surproduction de glycerol. En raison du desequilibre des balances carbonee et redox en resultant, la production d'ethanol est limitee et le flux carbone reoriente vers la production de differents metabolites (acetate, 2,3-butanediol et succinate). Ces souches presentent une vitesse de fermentation stimulee pendant la phase stationnaire, suggerant un controle du flux glycolytique par la disponibilite en nad. Le niveau d'acetate produit par ces souches etant largement superieur aux teneurs dans les vins, nous nous sommes attaches a reduire sa production, par ingenierie metabolique des enzymes impliquees dans le pdh by-pass.