Synthèse de dérivés du rhamnose : ciblage, isolement et identification d'une lectine membranaire de la peau
Institution:
Montpellier 2Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
Human epidermis is a selective barrier which is, to a large extent, assumed by keratinocytes. The aim of this work was to isolate and characterize L-rhamnose binding lectins (RBL) in human keratinocytes. This sugar is not synthetize by human cells and its receptor may participate to human surveillance. For this study, we have synthesized biotinylated L-rhamnose with differents type of linkers. We have studied its binding to skin proteins by various methods like western-blot, immunofluorescence assay, and immunoprecipitation. The molecular weight of RBL have been measured by gel electrophoresis (SDS-PAGE) and matrix-assisted laser desorption ionization time of flight (MALDI TOF) mass spectrometry. Thereafter, L-rhamnose–bearing surfactants has been incorporated in liposome bilayers in order to deliver various bioactive materials (DHEA, DNA. . . ) to human keratinocytes applicable in medicine as well as in cosmetic fields
Abstract FR:
L'épiderme humain est une barrière sélective constituée en majorité de kératinocytes. Le but de ce travail est d'isoler et de caractériser les lectines spécifiques du L-rhamnose dans les kératinocytes humains. Le L-rhamnose est un sucre que l'Homme ne peut pas synthétiser, mais les récepteurs de ce sucre pourraient participer aux défenses immunitaires. Pour cette étude, des dérivés biotinylés du L-rhamnose ont été synthétisés avec différents bras espaceurs. L'interaction de ce sucre avec des protéines de peau humaine a été étudiée par différentes méthodes, telles que la technique western-blot, la technique d'immunofluorescence indirecte, et le procédé d'immunoprécipitation. La masse moléculaire du récepteur spécifique du rhamnose a été mesurée sur gel SDS-PAGE et par spectrométrie de masse MALDI-TOF. Par la suite, des rhamnosurfactants ont été intégrés dans la bicouche lipidique de liposomes afin de vectoriser des molécules bioactives vers les kératinocytes pour une application ultérieure en médecine ou en cosmétique