Abstract FR:

Une lignee cellulaire derivee d'une tumeur de la glande mammaire de la rate (cellules wrk1) exprime un grand nombre de recepteurs de la vasopressine fonctionnellement couples a une activite phospholipase c. Ces cellules ont ete utilisees pour etudier les differentes etapes conduisant de la liaison de la vasopressine a son recepteur jusqu'a une augmentation transitoire de la concentration intracellulaire de calcium libre. Nous montrons successivement que: 1) le couplage recepteur-phospholipase c implique une proteine g (la phospholipase c est stimulable par les analogues non hydrolysables du gtp et les ions fluoroaluminate, la presence de gtp est indispensable a l'activation hormonale). 2) une accumulation transitoire d'ins(1,4,5)p3, identifie sur la base d'une separation hplc, est l'evenement le plus precoce de la stimulation hormonale. 3) la vasopressine provoque une augmentation de la concentration cytosolique de calcium parallele aux variations de la concentration intracellulaire d'ins(1,4,5)p3. 4) la stimulation hormonale augmente la sensibilite de la phospholipase c vis-a-vis du calcium, ce qui pourrait expliquer les mecanismes moleculaires mis en jeu. 5) des sites recepteurs de l'ins(1,4,5)p3 sont caracterises sur des fractions purifiees de reticulum endoplasmique. 6) une correlation est etablie entre la liaison de l'ins(1,4,5)p3 et une liberation induite de calcium. L'ensemble de ces resultats a permis d'attribuer un role central a l'ins(1,4,5)p3 au sein des mecanismes moleculaires impliques dans le mode d'action de la vasopressine sur les cellules wrk1