Abstract FR:

Nous avons comparé les effets induits par différents éliciteurs chez le tabac et leurs paramètres de fixation sur la membrane plasmique. Nous avons comparé deux élicitines acides et deux basiques : elles induisent qualitativement les mêmes effets sur des cellules de tabac (influx de ca#2#+, alcalinisation du milieu extracellulaire, production de FAO). Quantitativement, les élicitines basiques sont 20 à 50 fois plus actives pour induire l'alcalinisation du milieu extracellulaire et la production de FAO, alors que pour l'influx de Ca#2#+, la cryptogéine est beaucoup plus active que les trois autres élicitines. Nous avons montré que chaque élicitine interagit avec des caractéristiques similaires (K#d de l'ordre de 10 nm, nombre de sites, pH optimum de fixation) avec un site commun de la membrane plasmique. Il n'existe donc pas de corrélation entre la fixation des élicitines sur la membrane plasmique et leur activité biologique sur cellules. Nous avons également montre que les OGS induisent les mêmes effets que la cryptogéine mais ne se fixent pas sur les mêmes sites. En traitant les cellules de tabac successivement par ces deux éliciteurs, nous avons confirmé qu'il existe un mécanisme de désensibilisation homologue aux OGS, et montré que la cryptogéine induit une désensibilisation hétérologue aux élicitines et aux OGS. Nous avons déterminé que ces sites de fixation correspondent à une glycoprotéine intrinsèque de 160 kDa dont le motif glucidique, fixé sur un résidu asparagine, est impliqué dans l'interaction avec le ligand. Cette glycoprotéine pourrait être associée a un polypeptide de 50 kDa pour former un complexe fonctionnel hétérodimérique de l'ordre de 200 kDa, comme l'ont montré des expériences d'irradiation-inactivation. La cryptogéine se fixe sur la membrane plasmique d'autres plantes avec les mêmes caractéristiques (k#D, nombre de sites) sur des sites ayant les mêmes caractéristiques, bien qu'elle n'induise pas dans ces plantes (Acer, Arabidopsis) les effets induits chez le tabac. Nous avons proposé un modèle d'organisation de ce récepteur constitué d'une glycoprotéine membranaire de 160 kDa fixant l'élicitine associée à un polypeptide de 50 kDa. Le clonage des protéines affines pour la cryptogine a été entrepris en criblant une banque d’ADNc de tabac exprimée dans le système d'expression eucaryote cos.