thesis

Caractérisation moléculaire du métabolisme des acides phénols chez les bactéries lactiques Lactobacillus plantarum et Pediococcus pentosaceus

Defense date:

Jan. 1, 2000

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Institution:

Dijon

Disciplines:

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Abstract FR:

Les deux bactéries lactiques lactobacillus plantarum et pediococcus pentosaceus possèdent des activités enzymatiques inductibles qui leur permettent de métaboliser les acides p-coumarique, férulique et caféique en dérivés phénols volatils. Nous avons purifie et caractérise l'acide phénol decarboxylase (pad) de l. Plantarum, enzyme inductible par ses substrats. Le gène correspondant à été clone, de même que le gène pada codant la pad de p. Pentosaceus. Ces deux enzymes présentent des caractéristiques différentes de celles des pads de bacillus subtilis et de bacillus pumilus, notamment au niveau de la spécificité de substrat. L'analyse de protéines chimères, obtenues à partir des quatre pads natives, a montré l'implication de la région c-terminale dans l'activité de ces enzymes. La construction d'un mutant de l. Plantarum déficient pour l'activité pad a révélé l'existence, chez cette bactérie, d'une deuxième acide phénol decarboxylase et d'une activité acide phénol réductase. L'activité pad, indispensable à la souche sauvage de l. Plantarum pour croitre en milieu acide supplémenté en acide phénol, est assimilable à un mécanisme de réponse à un stress, qui permet de métaboliser les acides phénols en dérivés non toxiques. L'expression des gènes pad, chez l. Plantarum et p. Pentosaceus, est fortement régulée au niveau de la transcription par les acides phenols. Les répresseurs impliques dans la transcription des gènes pad ont été clonés et caractérisés chez ces deux bactéries. Ces deux régulateurs de transcription, nommes padr n'appartiennent a aucune famille de régulateur de transcription connue. Chez p. Pentosaceus, les gènes codant pour la pad et pour son répresseur sont organisés en operon tandis que chez l. Plantarum, les deux gènes sont organisés en divergon. Nos travaux ont permis l'identification d'une nouvelle famille de régulateurs de transcription padr, de type répresseur dont l'activité est modulée en réponse aux acides phénols.