thesis

Développement d'outils génétiques utilisables chez des myxobactéries : application à l'étude génétique de la production de myxothiazol chez Myxococcus fulvus

Defense date:

Jan. 1, 1989

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Institution:

Compiègne

Disciplines:

Abstract EN:

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Abstract FR:

On sait que les plasmides à large spectre d'hôte du groupe incP sont capables de se transférer de E. Coli chez M. Xanthus par conjugaison mais ne s'y conservent qu'à l'état intégré dans le chromosome. Nous avons cependant pu utiliser certains de ces plasmides pour transférer le transposon Tn5. Dans ces cas la fréquence de transposition est 20 a 50 fois plus élevée que la fréquence d'insertion du vecteur, les transposons sont insérés de façon aléatoire dans le chromosome et génèrent des mutations avec la même fréquence que lorsque le vecteur, plus classique P1:Tn5 est utilisé. L'avantage de ce système de transfert du Tn5 réside dans un spectre d'hôte plus large, puisque nous avons pu réaliser la transposition de Tn5 chez plusieurs espèces nouvelles de myxobactéries, et en particulier chez Stigmatella aurantiaca, chez qui le vecteur P1:Tn5 était reste inefficace àa ce jour. De plus le comportement des plasmides différé d'une souche à l'autre, en ce qui concerne la possibilité d'intégration dans le chromosome, et l'instabilité structurale qui en résulte. Nous avons testé l'applicabilité de la méthode de transfert de gènes par conjugaison à l'étude génétique de la production de myxothiazol par une souche de Myxococcus fulvus. Après avoir mis au point les méthodes de transfert, nous avons pu obtenir des mutants affectés dans la production de myxothiazol et possédant le transposon Tn5. Seuls des mutants hyper et hypoproducteurs ont été obtenus. Ils ont été utilisés dans des expériences de clonage en vue de retransférer les gènes mutés chez la souche sauvage de M. Fulvus.