Abstract FR:

La dissociation des peptidyl-arnt du ribosome pendant la synthese proteique est le processus majeur qui conduit a une terminaison prematuree de la traduction des arnm. Ces evenements sont qualifies d'erreurs de processivite. Une enzyme, la peptidyl-arnt hydrolase (pth) est necessaire au recyclage des arnt sequestres sous la forme de peptidyl-arnt ; c'est une enzyme essentielle que l'on trouve les procaryotes et les eucaryotes. Un mutant dont la croissance et l'activite enzymatique pth sont thermosensibles presente une inhibition de la synthese proteique ainsi qu'une accumulation de peptidyl-arnt a temperature non permissive. Afin d'etudier la structure de la pth et d'identifier les molecules qui interagissent avec l'enzyme, nous avons isole et caracterise des pseudorevertants de la souche thermosensible. Nous avons dans ce but mis au point une methode simple, rapide et precise de localisation des suppresseurs extrageniques. Nous avons montre que l'inhibition de la synthese proteique dans le mutant thermosensible etait due a une carence en lys-arnt#l#y#s. La surexpression du gene lysv qui code cet arnt restaure la croissance du mutant a 42c, alors que la surexpression d'autres arnt est sans consequence. Deux suppresseurs extrageniques semblent fonctionner de la meme maniere par surproduction de l'arnt#l#y#s, l'un est localise a 94' entre lysu et groesl et l'autre au voisinage de pth entre hema et chaa. Le mutant thermosensible est egalement supprime par la surexpression des proteines chaperon groes et groel, ou par une mutation secondaire dans le gene pth lui-meme