Etude du mécanisme d'action et de la régulation de la production de la microcine L
Institution:
La RochelleDisciplines:
Directors:
Abstract EN:
Despite the discovery of antibiotics in the early twentieth century, one of the current priorities in public health is to fight pathogens in humans and animals. Among the antimicrobial peptides, microcines, thanks to their original structure, represent an interesting alternative. These studies concern the mode of action and the regulation of the production of a microcine discovered in the laboratory, microcine L. We have characterized the molecular intermediates required for the Mcc L import in sensitive bacteria. They include siderophore receptor Cir, located in the outer membrane, as well as a system of periplasmic internalization requiring proton motive force and the TonB-ExbB/TolQ-ExbD/ExbD complex of transport. The TonB protein would seem to have an additional role in Mcc L activity. The transmembrane potential has been identified as a target of Mcc L, but its dissipation is not its first action. Mcc L would also act on the peptidoglycan. Then, we identified two promotor zones for the expression of the Mcc L structural gene (mclC) : one immediately upstream of the mclC gene and the other upstream of the immunity gene (mcll) allowing mcll and mclC to work as an operon. Mcc L production has proved regulated by repressive protein Fur, and then by iron concentration of the medium, on a Fur box, upstream from two promotors. Moreover, a second regulation seems possible and suggests the existence of an activating transcription sequence close to Fur box which remains to be determined.
Abstract FR:
Malgré la découverte des antibiotiques au début du XXème siècle, une des priorités actuelles en santé publique est de combattre des agents pathogènes pour l'Homme et l'animal. Parmi les peptides antimicrobiens, les microcines, grâce à leur structure originale, représenteraient une alternative intéressante. Ces travaux concernent le mode d'action et la régulation de la production d'une microcine découverte au laboratoire, la microcine L. Nous avons ainsi caractérisé les intermédiaires moléculaires nécessaires à l'importation de la Mcc L dans les bactéries sensibles. Ils comprennent le récepteur de sidérophores Cir, au niveau de la membrane externe, ainsi qu'un système d'internalisation périplasmique nécessitant la force proton motrice et le complexe de transport TonB-ExbB/TolQ-ExbD/ExbD. La protéine TonB semblerait avoir un rôle supplémentaire dans l'activité de la Mcc L. Le potentiel membranaire a été identifié comme une cible de la Mcc L, mais sa dissipation ne serait pas son action première. La Mcc L agirait également sur le peptidoglycane. Ensuite, nous avons identifié deux zones promotrices pour l'expression du gène de structure de la Mcc L (mclC) : l'une directement en amont du gène mclC et l'autre en amont du gène d'immunité mcll, permettant un fonctionnement en opéron de mcll et mclC. La production de la Mcc L s'est révélée régulée par la protéine répressive Fur, et donc par la concentration en fer du milieu, au niveau d'une boîte Fur en amont des deux promoteurs. De plus, une seconde régulation semble possible et laisse envisager l'existence d'une séquence activatrice de transcription proche de la boîte Fur et restant encore à déterminer.